南方红豆杉和银杏叶响应紫外辐射及土牛膝治疗大鼠关节炎的蛋白质组学研究

论文目录   致谢 第1-6页 摘要 第6-8页 Abstract 第8-19页 1 绪论 第19-54页   · 蛋白质组学技术 第19-25页     · 2-DE技…

论文目录  
致谢 第1-6页
摘要 第6-8页
Abstract 第8-19页
1 绪论 第19-54页
  · 蛋白质组学技术 第19-25页
    · 2-DE技术 第20-22页
    · 2D-DIGE技术 第22-23页
    · Label-free技术 第23-25页
  · 蛋白质组学研究进展 第25-44页
    · 植物蛋白质组学研究进展 第26-41页
      · 植物蛋白质组数据库建立 第26-27页
      · 植物蛋白提取方法改良 第27-28页
      · 植物遗传多样性蛋白质组研究 第28-29页
      · 植物器官及生长发育蛋白质组研究 第29-31页
      · 植物逆境响应和环境互作蛋白质组研究 第31-37页
      · 植物内外源激素蛋白质组研究 第37-38页
      · 植物各细胞器蛋白质组研究 第38-41页
    · 叶绿体蛋白质组学研究进展 第41-42页
    · 药用植物应用于疾病治疗蛋白质组学研究 第42-44页
  · 代谢组学 第44-46页
    · 代谢组学技术 第44-45页
    · 代谢组学研究进展 第45-46页
  · 紫外对植物的影响 第46-52页
    · 紫外对植物生理的影响 第47-49页
    · 紫外对植物代谢物的影响 第49-50页
    · 紫外对植物蛋白质组的影响 第50-51页
    · 紫外对植物基因的影响 第51-52页
  · 本研究的背景、主要内容及意义 第52-54页
2 南方红豆杉对UV-A辐射响应和防御机制的研究 第54-117页
  · 引言 第54-58页
    · 南方红豆杉主要成分 第54-55页
    · 红豆杉系统生物学研究进展 第55-57页
    · 红豆杉叶绿体研究进展 第57-58页
    · UV-A对红豆杉的影响 第58页
  · 实验材料与方法 第58-78页
    · 实验材料 第58-59页
    · 实验试剂 第59-61页
    · 实验仪器 第61-63页
    · UV-A辐射南方红豆杉条件筛选 第63页
    · 南方红豆杉针叶中化合物提取 第63页
    · 超高效液相色谱-质谱联用测定目标化合物含量 第63-64页
    · 透射电子显微镜分析 第64页
    · 南方红豆杉针叶蛋白的提取与纯化 第64-66页
      · 蛋白提取 第64-65页
      · 蛋白纯化 第65-66页
    · 南方红豆杉针叶Label-free差异蛋白质组学研究 第66-67页
      · 蛋白消化 第66页
      · NanoLC-MS/MS分析 第66页
      · 蛋白鉴定 第66-67页
      · 差异分析 第67页
    · 南方红豆杉针叶2-DE差异蛋白质组学 第67-71页
      · 等电聚焦 第67-68页
      · 胶条平衡 第68页
      · 第二向SDS电泳 第68页
      · 胶图显色与图像处理 第68-69页
      · 差异点的胶内酶解 第69-70页
      · 质谱鉴定 第70-71页
    · 南方红豆杉针叶叶绿体差异蛋白质组学研究 第71页
      · 南方红豆杉针叶叶绿体提取 第71页
      · 叶绿体蛋白提取纯化 第71页
      · 叶绿体label-free差异蛋白研究 第71页
    · 鉴定蛋白生物信息学分析 第71-72页
      · 应用Uniprot数据库进行蛋白分类 第72页
      · 蛋白相互作用及通路分析 第72页
    · 代谢组学代谢物萃取 第72-73页
    · 气相色谱-飞行时间质谱联用分析 第73页
    · 代谢组谱图处理 第73页
    · 南方红豆杉针叶总RNA提取 第73-75页
      · 样品处理 第73-74页
      · 总RNA提取及完整性检测 第74页
      · RNA浓度检测 第74页
      · 反转录生成mRNA模板 第74-75页
    · qRT-PCR分析 第75-77页
      · 特异性引物设计 第75-76页
      · qRT-PCR及产物特异性分析 第76-77页
    · 紫杉醇合成相关酶活性分析 第77-78页
      · DXR酶活测定 第77-78页
      · 莽草酸脱氢酶(SDH)酶活测定 第78页
  · 实验结果与分析 第78-116页
    · HPLC测定目标化合物含量 第78-82页
    · TEM电镜分析 第82-83页
    · 红豆杉针叶总蛋白提取定量结果 第83页
    · 南方红豆杉针叶差异蛋白质组分析 第83-105页
      · 南方红豆杉针叶Label-free差异蛋白质组 第84-92页
      · 南方红豆杉针叶2-DE差异蛋白质组 第92-98页
      · 南方红豆杉针叶Label-free与2-DE比较分析 第98-99页
      · 南方红豆杉针叶差异蛋白互作分析 第99页
      · 南方红豆杉叶绿体差异蛋白质组 第99-105页
    · 南方红豆杉针叶差异代谢组分析 第105-110页
      · 样本品质检测 第105页
      · 系统稳定性测定 第105-106页
      · 模型建立及多变量分析 第106-107页
      · 差异性表达代谢物分析 第107-110页
    · 紫杉醇合成途径关键酶基因表达趋势变化 第110-111页
    · 紫杉醇合成相关酶活性分析 第111-112页
    · 南方红豆杉UV-A辐射下应激和防御机制分析 第112-116页
      · UV-A导致光合作用和碳同化失衡 第112-113页
      · UV-A作用下糖酵解途径在碳消耗过程中占主导地位 第113-114页
      · UV-A辐射减弱营养代谢中枢循环 第114页
      · UV-A辐射选择性改变辅助底物补充过程 第114-115页
      · UV-A诱导南方红豆杉针叶紫杉醇生物合成 第115-116页
  · 结论 第116-117页
3 银杏药物成份改进和相关蛋白质组学研究 第117-150页
  · 引言 第117-120页
    · 银杏主要活性成分 第117-119页
    · 银杏蛋白质组及亚细胞器研究进展 第119页
    · UV-B对银杏影响 第119-120页
  · 实验材料与方法 第120-130页
    · 实验材料 第120页
    · 实验试剂 第120-123页
    · 实验仪器 第123-125页
    · UV-B辐射处理 第125页
    · 银杏叶片主要药用成分和有害成分分析 第125-126页
    · 透射电子显微镜分析 第126页
    · 生理指标及酶活测定 第126-129页
      · 植物色素含量测定 第126页
      · 可溶性蛋白测定 第126-127页
      · 可溶性糖测定 第127页
      · 丙二醛含量测定 第127-128页
      · 脯氨酸含量测定 第128页
      · 还原型谷胱甘肽(GSH)含量测定 第128页
      · 超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 第128页
      · 苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性测定 第128-129页
    · qRT-PCR分析 第129页
    · 银杏叶绿体差异蛋白质组学研究 第129-130页
      · 银杏叶绿体提取 第129页
      · 蛋白提取纯化 第129-130页
      · 银杏叶绿体差异蛋白质组学研究 第130页
  · 实验结果与分析 第130-149页
    · UV-B下银杏叶重要药理代谢物变化 第130-133页
    · 银杏叶片生理变化 第133-137页
      · 银杏叶片超微结构变化 第133-134页
      · 银杏叶片色素含量变化 第134-135页
      · 银杏叶片非酶促抗氧化系统变化 第135-136页
      · 银杏叶片酶促抗氧化系统变化 第136-137页
    · 黄酮合成关键基因表达趋势变化 第137-138页
    · 银杏叶绿体差异蛋白质组 第138-146页
      · 银杏叶绿体提取及质量检验 第138页
      · 银杏叶绿体蛋白提取 第138-139页
      · 银杏叶绿体双向电泳 第139-146页
      · 差异蛋白互作分析 第146页
    · UV-B辐射下应激和防御机制分析 第146-149页
      · UV-B抑制叶绿体光合系统 第146-147页
      · 代谢物变化可抵御UV-B辐射损伤 第147-148页
      · 抗氧化系统增强抵御UV-B辐射损伤 第148页
      · 胁迫相关蛋白参与UV-B防御机制 第148-149页
  · 结论 第149-150页
4 土牛膝治疗关节炎大鼠模型研究及其滑膜候选生物标记筛选 第150-182页
  · 引言 第150-152页
    · 关节炎治疗药物现状 第150-151页
    · 土牛膝临床和药效学研究进展 第151页
    · 蛋白质组学应用于关节炎研究进展 第151-152页
  · 实验材料与方法 第152-163页
    · 实验材料 第152-153页
    · 实验试剂 第153-155页
    · 实验仪器 第155-157页
    · 土牛膝药用成分提取分离和结构鉴定 第157-158页
    · 皂苷定量分析 第158-159页
      · 标准品和供试品制备 第158页
      · HPLC条件 第158页
      · 系统适用性考察 第158-159页
    · 关节炎模型的建立 第159页
    · 分组给药 第159页
    · 指标检测 第159页
    · X光骨骼检查 第159-160页
    · 组织切片观察 第160页
    · 荧光差异蛋白质组学分析 第160-162页
      · 蛋白提取 第160页
      · DIGE 第160-162页
      · 蛋白点鉴定 第162页
    · Western blot分析 第162-163页
  · 实验结果与分析 第163-181页
    · 土牛膝化合物分离与鉴定 第163-166页
    · 土牛膝皂苷定量分析 第166-168页
    · CIA模型建立 第168-169页
    · 土牛膝总皂苷对CIA大鼠体重影响 第169-170页
    · 土牛膝总皂苷对CIA大鼠足肿胀影响 第170-171页
    · 土牛膝总皂苷对CIA大鼠足骨骼侵蚀和炎症影响 第171-174页
    · CIA大鼠滑膜差异蛋白质组分析 第174-179页
    · Western blot验证 第179页
    · RA病理及土牛膝皂苷治疗候选生物标记物分析 第179-181页
  · 结论 第181-182页
5 结论与展望 第182-185页
  · 全文主要结论 第182-183页
  · 本文不足之处与展望 第183-185页
参考文献 第185-223页
作者简介 第223-224页

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