大豆异黄酮Genistein的脑缺血保护活性及以烟草作为生物反应器产生Genistein的初步研究

论文目录   摘要 第11-14页 ABSTRACT 第14-17页 缩略词表 第17-19页 第一章 文献综述 第19-45页 第一节 大豆异黄酮与人体健康 第19-3…

论文目录  
摘要 第11-14页
ABSTRACT 第14-17页
缩略词表 第17-19页
第一章 文献综述 第19-45页
第一节 大豆异黄酮与人体健康 第19-30页
1 大豆异黄酮的化学性质及来源 第20-21页
  1.1 大豆异黄酮的结构与化学性质 第20-21页
  1.2 大豆异黄酮的植物来源和含量 第21页
2 大豆异黄酮在植物中的生理功能 第21-22页
  2.1 参与防御反应 第21-22页
  2.2 固氮共生 第22页
3 大豆异黄酮与人体健康相关的生物学效应 第22-24页
  3.1 抗肿瘤活性 第23页
  3.2 防治妇女绝经后疾病 第23页
  3.3 调节血脂和减少心血管疾病 第23-24页
  3.4 神经保护作用 第24页
4 大豆异黄酮的药代动力学性质及可能的分子靶点 第24-26页
  4.1 雌激素样作用 第25页
  4.2 抗氧化作用 第25页
  4.3 抗炎活性 第25-26页
  4.4 相关酶和信号通路抑制作用 第26页
  4.5 基因甲基化调控 第26页
5 植物活性成分健康价值的评估方法 第26-30页
  5.1 流行病学研究 第26-27页
  5.2 细胞和动物模型 第27-28页
  5.3 临床研究 第28-30页
第二节 用于生产活性分子的植物系统研究进展 第30-36页
1 植物生物反应器研究进展 第30-33页
  1.1 植物生物反应器表达系统 第30-31页
  1.2 植物生物反应器的优点和局限性 第31-32页
  1.3 植物生物反应器应用实例 第32-33页
2 增加植物中活性分子生产研究策略 第33-36页
  2.1 代谢途径工程 第33-34页
  2.2 组织培养技术 第34-35页
  2.3 快速育种 第35页
  2.4 从生物炼制过程中获得活性分子 第35-36页
第三节 增加大豆异黄酮含量的遗传改良研究进展 第36-45页
1 大豆异黄酮生物合成途径 第36-40页
  1.1 苯丙氨酸解氨酶 第36-38页
  1.2 查尔酮合酶 第38页
  1.3 异黄酮合酶 第38-39页
  1.4 黄烷酮3-羟化酶 第39页
  1.5 查儿酮异构酶 第39-40页
  1.6 类黄酮途径调节基因 第40页
2 异黄酮代谢途径调控策略 第40-42页
  2.1 内源性关键代谢酶或转录因子的调控 第41页
  2.2 外源性关键代谢酶基因的表达 第41-42页
  2.3 外源性转录因子调控 第42页
  2.4 微生物生产 第42页
3 本研究的目的意义 第42-45页
第二章 GENISTEIN对小鼠脑缺血模型的保护活性及机制探讨 第45-61页
1 材料与方法 第45-50页
  1.1 动物 第45-46页
  1.2 药品与试剂 第46页
  1.3 主要仪器 第46页
  1.4 方法 第46-50页
    1.4.1 动物分组及处理 第46-47页
    1.4.2 小鼠局灶性大脑中动脉梗塞模型建立 第47页
    1.4.3 神经行为学评分 第47页
    1.4.4 脑梗死体积测定 第47-48页
    1.4.5 细胞凋亡分析 第48-49页
    1.4.6 脑组织SOD,MDA和GPx的测定 第49页
    1.4.7 皮层线粒体制备 第49页
    1.4.8 组织及线粒体内ROS生成测定 第49页
    1.4.9 Caspase-3活性分析 第49-50页
    1.4.10 Western Blot 第50页
    1.4.11 数据统计 第50页
2 结果与分析 第50-56页
  2.1 Genistein对脑缺血小鼠脑梗死体积和神经行为学评分的影响 第50-51页
  2.2 Genistein对脑缺血小鼠神经细胞凋亡的影响 第51-52页
  2.3 Genistein对脑缺血小鼠抗氧化酶活性及MDA含量的影响 第52-53页
  2.4 Genistein对脑缺血小鼠ROS生成的影响 第53-54页
  2.5 Genistein对脑缺血小鼠线粒体功能的影响 第54-55页
  2.6 Genistein对脑缺血小鼠NF-κB信号通路激活的影响 第55-56页
3 讨论 第56-61页
第三章 GENISTEIN对体外神经元氧化损伤的保护作用及机制探讨 第61-73页
1 材料与方法 第61-64页
  1.1 动物 第61页
  1.2 药品 第61-62页
  1.3 主要仪器 第62页
  1.4 实验方法 第62-64页
    1.4.1 原代神经元培养 第62页
    1.4.2 过氧化氢损伤模型建立和药物处理 第62-63页
    1.4.3 ROS生成测定 第63页
    1.4.4 Hoechest 33258染色 第63页
    1.4.5 Caspase-3和caspase-9活性分析 第63页
    1.4.6 Western Blot 第63-64页
    1.4.7 数据统计 第64页
2 结果与分析 第64-70页
  2.1 Genistein对过氧化氢诱导的神经元细胞损伤的保护作用 第64-65页
  2.2 Genistein对过氧化氢诱导的神经元ROS生成的影响 第65-66页
  2.3 Genistein对过氧化氢诱导的神经元凋亡的影响 第66-67页
  2.4 Genistein对氧化应激诱导的凋亡相关蛋白表达的影响 第67-68页
  2.5 Genistein对过氧化氢诱导的神经元NF-κB信号通路激活的影响 第68-69页
  2.6 Genistein对过氧化氢诱导的神经元JNK和ERK信号通路激活的影响 第69-70页
3 讨论 第70-73页
第四章 在烟草系统中产生GENISTEIN的遗传修饰 第73-97页
1 材料与方法 第73-82页
  1.1 实验材料 第73-74页
  1.2 主要试剂 第74页
  1.3 供试菌株和载体 第74页
  1.4 主要仪器 第74页
  1.5 实验方法 第74-82页
    1.5.1 总RNA的提取、纯化及cDNA第一链的合成 第74-75页
    1.5.2 大豆IFS1和IFS2基因cDNA片段的克隆 第75-76页
    1.5.3 植物过量表达载体的构建 第76-78页
    1.5.4 农杆菌叶盘浸染法转化烟草 第78-79页
    1.5.5 转基因植株阳性鉴定 第79-80页
    1.5.6 转基因植株基因表达分析 第80-81页
    1.5.7 转基因植株基因拷贝数检测 第81页
    1.5.8 转基因植株Genistein含量测定 第81页
    1.5.9 数据统计 第81-82页
2 结果与分析 第82-92页
  2.1 IFS1和IFS2基因的克隆及序列分析 第82-83页
  2.2 IFS1和IFS2基因表达载体的构建和验证 第83-84页
  2.3 重组质粒转化根癌农杆菌 第84页
  2.4 转基因烟草的分子鉴定 第84-85页
  2.5 转基因烟草的基因表达分析 第85-88页
  2.6 转基因烟草的基因拷贝数检测 第88-90页
  2.7 转基因烟草植株表型分析 第90-91页
  2.8 转基因烟草Genistein含量检测 第91-92页
3 讨论 第92-97页
全文结论 第97-99页
本研究创新之处 第99-101页
参考文献 第101-121页
附录 第121-139页
附录一 实验方法 第121-130页
附录二 常用培养基和相关试剂的配置 第130-134页
附录三 基因序列信息 第134-139页
攻读学位期间已发表及待发表学术论文 第139-141页
致谢 第141页

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