南蛇藤总萜调控CSN6蛋白抑制结直肠癌的作用及机制研究

论文目录   中文摘要 第1-10页 英文摘要 第10-14页 符号说明 第14-16页 前言 第16-27页 参考文献 第21-27页 第一部分 CSN6、Myc蛋白在…

论文目录  
中文摘要 第1-10页
英文摘要 第10-14页
符号说明 第14-16页
前言 第16-27页
参考文献 第21-27页
第一部分 CSN6、Myc蛋白在人结直肠癌组织中的表达及临床意义 第27-40页
1 材料 第27-29页
  1.1 组织及病理切片来源 第27页
  1.2 临床病理资料 第27页
  1.3 实验试剂 第27-28页
  1.4 主要仪器 第28页
  1.5 主要试剂配制 第28-29页
2 方法 第29-33页
  2.1 组织免疫组化染色 第29-30页
  2.2 实时荧光定量PCR (RT-qPCR) 第30-33页
3 结果 第33-36页
  3.1 资料分析型 第33页
  3.2 CSN6、Myc蛋白在结直肠癌组织中的表达 第33-35页
  3.3 qRT- PCR检测CSN6结果 第35-36页
4 讨论 第36-38页
参考文献 第38-40页
第二部分 南蛇藤总萜诱导人结直肠癌HT-29细胞凋亡与自噬的实验研究 第40-68页
1 材料 第41-45页
  1.1 药品 第41页
  1.2 细胞株 第41页
  1.3 实验试剂 第41-42页
  1.4 主要仪器 第42-43页
  1.5 主要试剂配制 第43-45页
  1.6 引物设计 第45页
2 方法 第45-52页
  2.1 药物准备 第45-46页
  2.2 细胞培养 第46页
  2.3 细胞活力实验(MTT法) 第46页
  2.4 流式细胞仪检测检测COE对HT-29细胞凋亡的影响 第46页
  2.5 流式细胞仪检测COE对HT-29细胞周期的影响 第46-47页
  2.6 流式细胞仪检测线粒体膜电位的改变 第47页
  2.7 透射电镜样品制备与观察细胞凋亡小体与自噬体的形态 第47-48页
  2.8 Western blot实验 第48-50页
  2.9 RT-PCR检测BeclinlmRNA、LC3mRNA 第50-52页
  2.10 统计学处理 第52页
3 结果 第52-59页
  3.1 COE抑制HT-29增殖 第52页
  3.2 透射电镜观察HT-29细胞凋亡小体 第52-53页
  3.3 流式细胞仪检测检测COE对HT-29细胞凋亡的影响 第53页
  3.4 流式细胞仪检测检测COE对HT-29细胞周期的影响 第53-54页
  3.5 流式细胞仪检测HT-29细胞线粒体膜电位 第54-55页
  3.6 Western blotting分析COE对Bcl-2家族蛋白及caspases酶的表达影响 第55-56页
  3.7 COE诱导结直肠癌HT-29细胞自噬的产生 第56-58页
  3.8 自噬激动剂Rapamycin和抑制剂3-MA调节自噬水平对凋亡的影响 第58-59页
4 讨论 第59-64页
参考文献 第64-68页
第三部分 COE诱导结直肠癌HT-29细胞凋亡及自噬的分子机制 第68-89页
1 材料 第68-70页
  1.1 药品 第68页
  1.2 细胞株细胞、质粒和菌株 第68页
  1.3 实验试剂 第68-69页
  1.4 CSN6基因的编码序列克隆引物设定 第69页
  1.5 主要仪器 第69-70页
  1.6 主要试剂配制 第70页
2 方法 第70-75页
  2.1 药物准备 第70页
  2.2 细胞培养 第70页
  2.3 Western blot实验 第70页
  2.4 RT-PCR检测HT-29细胞中的CSN6mRNA 第70-71页
  2.5 重组逆转录病毒质粒MIGR1-CSN6、MIGR1-Akt的构建及鉴定 第71-74页
  2.6 脂质体介导法转染细胞 第74-75页
  2.7 流式细胞术检测转染效率 第75页
  2.8 筛选建立稳定过表达MIGRI-CSN6、MIGR1-Akt基因的结直肠癌细胞株 第75页
  2.9 统计学处理 第75页
3 结果 第75-83页
  3.1 COE对CSN6及其下游基因表达的影响 第75-76页
  3.2 重组逆转录病毒质粒MIGR1-CSN6、MIGRI-Akt的构建及鉴定 第76-79页
  3.3 筛选稳定过表达CSN6、Akt基因的结直肠癌细胞株 第79-81页
  3.4 CSN6过表达对COE抑制HT-29细胞增殖的影响 第81-82页
  3.5 Akt激酶过表达对CSN6-Myc信号轴的影响 第82页
  3.6 COE对PI3K/Akt信号通路活化的影响 第82-83页
4 讨论 第83-86页
参考文献 第86-89页
文献综述一 第89-101页
参考文献 第95-101页
文献综述二 第101-119页
参考文献 第110-119页
致谢 第119-120页
攻读博士期间发表的学术论文目录 第120-121页

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