紫外线B辐照诱导大鼠角膜上皮细胞凋亡与枸杞多糖对凋亡的抑制作用及其机理研究

论文目录   中文摘要 第1-5页 Abstract 第5-12页 第一章 绪论 第12-32页   1.1 紫外线 第12-15页     1.1.1 紫外线的三个波段…

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中文摘要 第1-5页
Abstract 第5-12页
第一章 绪论 第12-32页
  1.1 紫外线 第12-15页
    1.1.1 紫外线的三个波段及其主要特点 第12-13页
    1.1.2 紫外线辐照损伤机制 第13-14页
    1.1.3 紫外线的益处 第14-15页
  1.2 紫外线对哺乳动物眼的损害 第15-18页
    1.2.1 哺乳动物眼和角膜的结构 第15页
    1.2.2 紫外线对于角膜的损害 第15-17页
    1.2.3 紫外线对于晶状体和视网膜的损害 第17-18页
  1.3 细胞凋亡 第18-24页
    1.3.1 细胞凋亡简介 第18-19页
    1.3.2 细胞凋亡的机制 第19-22页
    1.3.3 细胞凋亡的常用检测方法 第22-24页
  1.4 与细胞凋亡相关的细胞信号通路 第24-28页
  1.5 枸杞多糖的药理学活性及其作用机理 第28-31页
    1.5.1 枸杞与枸杞多糖及其药理学活性 第28页
    1.5.2 枸杞多糖作用机理的研究现状 第28-30页
    1.5.3 枸杞多糖对眼的保护作用的研究现状 第30-31页
  1.6 本实验的研究目的和意义 第31-32页
第二章 实验材料和方法 第32-47页
  2.1 实验材料 第32-36页
    2.1.1 实验动物 第32页
    2.1.2 主要试剂及溶液配制 第32-35页
    2.1.3 主要实验仪器(仪器名称:品牌,型号,生产国家) 第35-36页
    2.1.4 主要实验耗材 第36页
  2.2 实验方法 第36-47页
    2.2.1 原代大鼠角膜上皮细胞的提取与培养 第36页
    2.2.2 细胞接种 第36-37页
    2.2.3 细胞免疫荧光实验 第37页
    2.2.4 UVB辐照模型 第37-38页
    2.2.5 LBPs处理实验模型 第38页
    2.2.6 细胞形态微分干涉成像观察 第38页
    2.2.7 Hoechst 33258 染色检测细胞核变化 第38-39页
    2.2.8 细胞活力检测 第39页
    2.2.9 细胞凋亡率检测 第39-40页
    2.2.10 细胞线粒体膜电位检测 第40页
    2.2.11 细胞活性氧水平检测 第40页
    2.2.12 凋亡相关基因表达水平检测 第40-43页
    2.2.13 蛋白质免疫印迹(western blotting)检测蛋白表达变化 第43-44页
    2.2.14 转录组测序(RNA-seq)相关检测与分析 第44-45页
    2.2.15 数据分析 第45-47页
第三章 实验结果 第47-75页
  3.1 原代大鼠角膜上皮细胞的纯度鉴定 第47-48页
  3.2 UVB诱导大鼠角膜上皮细胞凋亡的动态变化和时序 第48-54页
    3.2.1 UVB辐射后细胞形态的变化 第48-49页
    3.2.2 UVB辐射后细胞活力的变化 第49-50页
    3.2.3 UVB辐射后细胞凋亡率的变化 第50-52页
    3.2.4 UVB辐射后细胞线粒体膜电位的变化 第52页
    3.2.5 UVB辐射后凋亡基因mRNA水平的变化 第52-54页
  3.3 LBPs对UVB诱导的大鼠角膜上皮细胞凋亡的抑制作用 第54-60页
    3.3.1 LBPs提升经UVB辐照的RCE细胞的活力 第54-55页
    3.3.2 LBPs对UVB辐照诱导的RCE细胞形态和核形态变化的影响 第55-59页
    3.3.3 LBPs降低经UVB辐照的RCE细胞的凋亡率 第59-60页
  3.4 LBPs对UVB诱导的大鼠角膜上皮细胞凋亡抑制作用的机理 第60-64页
    3.4.1 LBPs阻止UVB诱导的细胞线粒体膜电位的损失 第60-61页
    3.4.2 LBPs影响UVB诱导的细胞凋亡基因表达 第61-62页
    3.4.3 LBPs减弱UVB引发的JNK磷酸化 第62-63页
    3.4.4 LBPs减少UVB诱导的细胞ROS的释放 第63-64页
  3.5 LBPs保护RCE细胞对抗UVB辐照诱导损伤的转录组分析 第64-75页
    3.5.1 转录组文库的建立与基因比对 第64-66页
    3.5.2 表达量分析与差异表达基因的分析 第66-69页
    3.5.3 差异表达基因的GO功能富集分析 第69-72页
    3.5.4 差异表达基因的KEGG富集分析:凋亡通路及JNK和p38 MAP激酶通路 第72-75页
第四章 讨论 第75-84页
  4.1 RCE细胞的原代培养经验与UVB辐照诱导RCE细胞凋亡的时序 第75-78页
  4.2 LBPs作为保护药物的选择理由及其优势 第78-79页
  4.3 LBPs通过凋亡的线粒体途径来抑制细胞凋亡 第79-80页
  4.4 LBPs通过抑制JNK磷酸化抑制细胞凋亡 第80-81页
  4.5 ROS与细胞凋亡的关系及LBPs抑制ROS水平的提升 第81-82页
  4.6 UVB辐照诱导细胞损伤及LBPs抑制该损伤中转录组的变化 第82-84页
第五章 结论 第84-87页
  5.1 主要结论 第84页
  5.2 实验展望 第84-87页
参考文献 第87-103页
附录 缩略词表 第103-107页
在学期间的研究成果 第107-108页
致谢 第108-109页

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