盐酸千金藤碱对人卵巢癌的作用及其机制的研究

论文目录   摘要 第1-9页 abstract 第9-19页 符号说明 第19-21页 引言 第21-24页 第一部分 盐酸千金藤碱对人卵巢癌细胞增殖、侵袭能力的影响及…

论文目录  
摘要 第1-9页
abstract 第9-19页
符号说明 第19-21页
引言 第21-24页
第一部分 盐酸千金藤碱对人卵巢癌细胞增殖、侵袭能力的影响及其作用机制 第24-55页
前言 第24-25页
1 材料 第25-28页
  1.1 细胞株 第25页
  1.2 主要仪器 第25-26页
  1.3 药品与试剂 第26-27页
  1.4 药品试剂配制 第27-28页
    1.4.1 细胞培养试剂配制 第27页
    1.4.2 其他药品试剂配制 第27-28页
2 方法 第28-36页
  2.1 细胞培养 第28-30页
    2.1.1 细胞换液 第28页
    2.1.2 细胞传代 第28-29页
    2.1.3 细胞冻存 第29页
    2.1.4 细胞复苏 第29页
    2.1.5 细胞计数 第29-30页
  2.2 MTT法检测CH对细胞增殖的影响 第30-31页
  2.3 ANNEXIN Ⅴ- FITC / PI双染法检测CH对细胞凋亡的影响 第31页
  2.4 划痕实验检测CH对细胞迁移的影响 第31-32页
  2.5 TRANSWELL法检测CH对细胞侵袭的影响 第32-33页
  2.6 RT-QPCR检测CH对凋亡和侵袭相关基因表达的影响 第33-36页
    2.6.1 细胞处理 第33页
    2.6.2 Trizol法提取细胞总RNA 第33-34页
    2.6.3 引物设计与合成 第34页
    2.6.4 逆转录 第34-35页
    2.6.5 实时定量PCR扩增Bcl-2 和MMP-2 基因 第35-36页
  2.7 统计学分析 第36页
3 结果 第36-46页
  3.1 CH抑制卵巢癌A2780细胞的增殖 第36-38页
  3.2 CH促进卵巢癌A2780细胞的凋亡 第38-40页
  3.3 CH抑制卵巢癌细胞A2780的迁移 第40-42页
  3.4 CH抑制卵巢癌A2780细胞的侵袭 第42-44页
  3.5 CH降低卵巢癌A2780细胞BCL-2、MMP-2 和MMP-9 的MRNA表达水平 第44-46页
4 讨论 第46-48页
5 小结 第48-49页
参考文献 第49-55页
第二部分 盐酸千金藤碱对人卵巢癌细胞多药耐药的逆转及其作用机制 第55-88页
前言 第55-56页
1 材料 第56-59页
  1.1 细胞株 第56页
  1.2 主要仪器 第56-57页
  1.3 药品与试剂 第57-58页
  1.4 药品试剂配置 第58-59页
    1.4.1 细胞培养试剂和药品配制 第58页
    1.4.2 Western blot试剂配制 第58-59页
2 方法 第59-67页
  2.1 细胞培养 第59-60页
  2.2 MTT法检测CH对A2780/TAXOL耐药的逆转作用 第60-61页
    2.2.1 A2780/Taxol细胞耐药性的鉴定 第60页
    2.2.2 CH对A2780/Taxol细胞耐药的逆转作用 第60-61页
  2.3 罗丹明蓄积实验检测CH对P-GP功能的影响 第61-62页
  2.4 RT-QPCR检测CH对MDR1 MRNA表达的影响 第62-63页
    2.4.1 细胞处理 第62页
    2.4.2 引物设计与合成 第62-63页
  2.5 WESTERN BLOT检测CH对P-GP表达水平的影响 第63-66页
    2.5.1 细胞处理 第63页
    2.5.2 细胞总蛋白的提取 第63-64页
    2.5.3 BCA法测定蛋白浓度 第64页
    2.5.4 聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳 第64-65页
    2.5.5 转膜 第65-66页
    2.5.6 封闭 第66页
    2.5.7 蛋白条带显色 第66页
  2.6 WESTERN BLOT检测CH对PI3K/AKT信号传导通路的影响 第66-67页
    2.6.1 细胞处理 第66-67页
    2.6.2 细胞总蛋白提取、定量 第67页
    2.6.3 Western blot 第67页
  2.7 统计学分析 第67页
3 结果 第67-79页
  3.1 卵巢癌A2780/TAXOL细胞耐药性的鉴定 第67-68页
  3.2 CH增强卵巢癌A2780/TAXOL细胞对紫杉醇的敏感性 第68-69页
  3.3 CH增加RHO-123 在卵巢癌A2780/TAXOL细胞中的蓄积 第69-72页
  3.4 CH降低卵巢癌A2780/TAXOL细胞MDR1基因MRNA的表达 第72-73页
  3.5 CH降低卵巢癌A2780/TAXOL细胞P-GP的表达 第73-74页
  3.6 CH降低卵巢癌A2780/TAXOL细胞T-AKT和P-AKT的表达 第74-77页
  3.7 CH对卵巢癌A2780/TAXOL细胞PI3K/AKT通路的影响 第77-79页
4 讨论 第79-81页
5 小结 第81-82页
参考文献 第82-88页
全文结论 第88-89页
创新点 第89-90页
综述 肿瘤耐药及其逆转的研究现状 第90-122页
综述参考文献 第106-122页
个人简历、在学期间发表的学术论文 第122-123页
致谢 第123页

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