Hnf1β和Foxa3四环素诱导型表达载体介导小鼠胚胎成纤维细胞转分化获得肝干细胞及其相关分子机制

论文目录   摘要 第6-8页 Abstract 第8-9页 缩略词表 第9-10页 前言 第10-14页 实验材料与方法 第14-35页 一、实验器材设备与耗材 第14…

论文目录  
摘要 第6-8页
Abstract 第8-9页
缩略词表 第9-10页
前言 第10-14页
实验材料与方法 第14-35页
一、实验器材设备与耗材 第14-15页
(一)常用仪器设备 第14页
(二)常用耗材 第14-15页
二、实验试剂及其制备 第15-21页
(一)细胞培养用主要试剂及其制备 第15-16页
(二)分子生物学实验主要试剂及其制备 第16-20页
(三)免疫实验主要试剂及制备 第20-21页
三、实验方法 第21-35页
(一)四环素诱导型双因子表达载体的构建与提取 第21-26页
(二)四环素控制的iHepSC诱导体系的建立 第26-28页
(三)iHepSCs-Dox细胞生物学特性鉴定 第28-31页
(四)iHepSCs-Dox的生长特性检测 第31-32页
(五)Tet表达检测 第32-33页
(六)DNA甲基化及羟甲基化水平检测 第33-35页
实验结果 第35-50页
一、四环素诱导型慢病毒载体的构建与鉴定 第35-36页
二、四环素诱导型载体表达检测及最适Doxycycline诱导浓度的确定 第36-39页
三、TetO-Hnf1β-EGFP与TetO-Foxa3-mCherry可对MEF细胞进行有效重编程,获得iHepSCs-Dox细胞 第39-45页
四、Tet参与MEF细胞转分化为iHepSCs的过程 第45-50页
讨论 第50-52页
参考文献 第52-55页
综述 提高细胞重编程效率和安全性的策略 第55-66页
参考文献 第61-66页
附录:慢病毒载体图谱 第66-69页
攻读学位期间发表论文 第69-70页
致谢 第70页

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